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動物組織中磺胺類藥物的測定
文章來源:島津實驗器材公眾號
目前,人們對動物源性食品的需求日益增加,養殖場為預防或治療畜禽疾病的過程中會借助多種獸藥?;前奉愃幬餅槿斯ず铣傻目咕?,具有抗菌譜較廣、性質穩定、使用簡便、生產時不耗用糧食等優點,是常用的獸藥品種之一。然而,超量使用獸藥不僅會危害公眾的健康,而且也會對環境造成污染。因此,一方面,我們要嚴格控制獸藥的使用,另一方面,我們要對動物源性食品中的獸藥殘留進行檢測監測,守護食品安全。本方法適用于動物組織中磺胺類藥物的測定中的前處理步驟。
1、提取
(1)取 5 g 樣品于50 mL離心管中,加入5 g 無水硫酸鈉、25 mL 乙酸乙酯,10000 rpm 下均質2min,于4000 rpm 下離心2min,收集乙酸乙酯,向離心管中加入25 mL 乙酸乙酯重復提取一次,合并收集的乙酸乙酯,于30 ℃下減壓蒸餾至近干;
(2)向蒸餾瓶中加入1 mL 甲醇、2 mL 1% 乙酸水溶液和3 mL 正己烷,渦旋混合1 min,收集復溶液至15 mL 離心管中,重復溶解一次,并收集復溶液;
(3)將復溶液渦旋混合1 min,于4000 rpm 下離心1 min,棄去正己烷,再加入6 mL 正己烷重復操作一次,再向下層液體加入6 mL 水,待凈化。
2、凈化
SHIMSEN Styra HLB,60 mg / 3 mL
(貨號:380-00855-03)
(1)活化:向柱中依次加入3 mL 甲醇、3 mL 水,棄去流出液;
(2)上樣:將待凈化液加入柱中,棄去流出液;
(3)淋洗:依次用3 mL 水、3 mL 5% 甲醇水溶液淋洗小柱,棄去流出液,于負壓裝置(PN:RT-26077)中抽干小柱;
(4)洗脫:向柱中加入5 mL 甲醇,收集洗脫液;
(5)重新溶解:將洗脫液在30 ℃下減壓蒸餾至近干,用1 mL 流動相溶解殘渣,經微孔濾膜過濾后供HPLC 分析。
注:步驟(5)為參考步驟,使用者可根據自己使用的分析儀器進行適當調整。
附:參考方法
一、分析條件
1、色譜條件
色譜柱:
Shim-pack GIST C18-AQ,
5 μm,4.6×250 mm
(貨號:227-30742-08)
流速:1.0 mL/min
進樣量:20μL
柱溫:35 ℃
檢測器:UV 270 nm
流動相:A:乙腈,B:2%冰乙酸水溶液,梯度設置如下表
二、實驗結果
1、8種磺胺類化合物標準品的液相色譜圖
1. 磺胺吡啶;2. 磺胺甲基嘧啶;3. 磺胺二甲基嘧啶;4. 磺胺甲氧噠嗪;5. 磺胺甲惡唑;6. 磺胺異惡唑;7. 磺胺喹惡啉;8. 磺胺間二甲氧基嘧啶
2、添加回收結果(添加濃度:0.1 mg/kg)